{正版}医学生物学与医学细胞生物学实验教程（第２版）/光学显微镜的构造/核酸成分的检测/染色体G显带及SCE标本的制备/人类遗传病-图书推荐

基本信息

书名:医学生物学与医学细胞生物学实验教程（第２版）

原书定价：25元

作者:李虹，梁素华 编

出版社：科学出版社

出版日期：2014-06-01

ISBN：9787030411020

字数：189000

页码：152

版次：1

装帧：平装

开本：16开

商品重量：

目录

第二版前言
版前言实验规则
实验一 光学显微镜的构造及使用方法t1
实验二 光学显微镜下的细胞形态结构观察t11
实验三 核酸成分的检测t18
实验四 细胞器及细胞骨架标本的制备与观察t22
实验五 小鼠腹腔巨噬细胞吞噬活动观察t28
实验六 细胞核的分离与鉴定t31
实验七 细胞有丝分裂标本的制备与观察t34
实验八 细胞减数分裂标本的制备与观察t39
实验九 小鼠骨髓细胞染色体标本的制备与观察t44
实验十 人外周血淋巴细胞染色体标本的制备与观察t48
实验十一 染色体 G显带及 SCE标本的制备与观察 t53
实验十二 人体细胞染色体 G显带核型分析t58
实验十三 动物细胞的原代培养t65
实验十四 培养细胞的传代及冻存复苏t72
实验十五 培养细胞的活力测定t79
实验十六 动物细胞融合t83
实验十七 染色体提前凝聚的诱导与观察t87
实验十八 流式细胞术t92
实验十九 细胞凋亡的诱导与检测t99
实验二十 人类性别鉴定及几种遗传性状的检查t107
实验二十一 人类遗传病家系分析t114
实验二十二 家兔解剖t119

内容提要

《医学生物学与医学细胞生物学实验教程》第2 版一书是普通高等教育“十一五” 规划教材《医学生物学》第8 版和《医学细胞生物学》第7版的配套教材。医学生物学与医学细胞生物学实验教程第2版共有22 个实验内容，其中既有巩固和强化基础知识、基本理论及基本技能训练的实验，也有部分着重培养学生能力的综合性、探索性及创新性实验。

文摘

实验一光学显微镜的构造及
使用方法
实 验 目 的

1．
掌握光学显微镜的主要结构和功能。

2．
熟悉光学显微镜的正确使用方法。

3．
了解光学显微镜的维护方法。
实 验 用 品

一、器材
普通光学显微镜、光学显微镜构造图、擦镜纸。
二、材料
家兔肌肉、肝脏或肾脏切片标本。

显微镜的类型

一、光学显微镜
（一）普通光学显微镜
普通光学显微镜（ ordinAry light microscope，OLM）是应用昀广泛的显微镜，放大倍数为 1000～ 1500倍。常用于观察细胞的一般形态结构，可看到细胞核、核仁、细胞膜、线粒体、中心体、高尔基复合体及染色体等结构。
（二）倒置显微镜
倒置显微镜（inverted microscope）的物镜位于标本下方，光源位于标本上方。该种显微镜主要用于观察培养细胞等活体标本。
（三）暗视野显微镜
暗视野显微镜（ dArk . eld microscope）的特点是使用中央遮光板或暗视野集光器，使光线通过集光器透镜边缘，倾斜地照射在标本上，经标本的反射或散射后再射入物镜内，因此整个视野是暗的，所观察到的是被检物体的衍射光图像。暗视野显微镜一般用于观察微小生物的运动、活细胞的结构及细胞内微粒的运动等。
（四）荧光显微镜
荧光显微镜（ . uorescence microscope）是在普通光学显微镜上加荧光光源、激发滤片、双色束分离器和阻断滤片等组成。荧光光源一般采用超高压汞灯（50～ 200W），经过激发滤片系统发出一定波长的激发光（如紫外光或紫蓝光），激发标本内的荧光物质发射出各种不同颜色的荧光，再通过物镜、目镜的放大进行观察。荧光显微镜主要用于研究细胞的结构、功能及化学成分等。
（五）相差显微镜
相差显微镜（ phAse contrAst microscope）的主要结构特点是在光学系统中有一套特殊装置（如环状光圈和带相板的物镜等），能改变直射光或衍射光的相位；并利用光的衍射和干涉现象，把相差变成振幅差（明暗差），增强反差，以利于观察活体标本或未染色的标本。
（六）共焦点激光扫描显微镜
共焦点激光扫描显微镜（ confocAl lAser scAnning microscope，CLSM）的特点是物镜和聚光镜同时聚焦到一个小点，即共聚焦。其优点是实现了点照明，保证只使来自聚焦点的光成像，再加上图像信息的计算机三维重建处理，使观察的标本图像更加清晰。共焦点激光扫描显微镜可用于观察活体胚胎、大脑皮层内微循环、细胞内的网络结构（如内膜系统、细胞骨架及原位染色体等）。
（七）电视显微镜
电视显微镜（ video microscope）又叫智能显微镜，它是将普通光学显微镜与彩色高分辨摄像头、高保真录像机及彩色监视器结合制成，使观察效果得到很大的提高并能有效记录。若配上彩色高分辨数码相机、高清晰彩色打印机，就可在观察标本的同时得到高清晰图片。
二、电子显微镜
1932年，德国科学家 MAx Knolls和 Emst RuskA发明了电子显微镜（ electromicroscope）。1939年，西门子公司制造出分辨率达 30
的世界上昀早的实用电子显微镜。电子显微镜的发明和应用，使细胞生物学的研究由显微水平跃进到亚显微水平，巨大地推动了细胞生物学的发展。
（一）透射电子显微镜
透射电子显微镜（ trAnsmissioelectromicroscope，TEM）是由电子枪发射的高速电子束经高压加速和聚光透镜的聚焦，然后穿过样品再经过多级电磁透镜（物镜、中间镜、投影镜）放大，昀后将高度放大的图像显示在荧光屏上或记录在照相装置中。用于透射电子显微镜观察的样品必须做成超薄切片，一般厚度为 30～ 60nm。
（二）扫描电子显微镜
扫描电子显微镜（ scAnning electromicroscope，SEM）是利用由电子枪发射并经过加速、聚集形成的一束很细小的电子束，在样品表面扫描时电子束中的电子与样品中的原子作用可产生二次电子。二次电子信号的大小依样品表面的外形而异，因而利用反射回来的二次电子信号，经收集放大，在荧光屏上显示出样品表面高度放大的立体图像。用于扫描电子显微镜观察的样品制备较简单，不必制成超薄切片。
（三）扫描隧道电子显微镜
1981年，由 IBM苏黎世实验室的 Bining等发明了放大倍数可达 3亿倍的扫描隧道电子显微镜（ scAnning tunneling electromicroscope，STM）。 STM是根据量子隧道效应而设计的，可在原子水平上显示物体的表面结构。其分辨力在常温常压下可达纳米以下，高于透射电子显微镜的分辨力。用扫描隧道电子显微镜可直接观察 DNA和蛋白质的表面形态，也可对生物膜进行观察分析。
（四）超高压电子显微镜
超高压电子显微镜（ ultrA-high voltAge electromicroscope，UEM）是我国昀大型的透射电子显微镜，它主要用于观测生物样品、矿物、器件透射电子显微像及电子衍射图，对样品微观结构、组织特征鉴定及缺陷研究等进行定性定量分析。可对样品在加热、拉伸、电子辐照等条件下微观组织的变化过程进行动态观测。与普通电子显微镜相比较，它可以进行微观过程的动态实验观察、辐照效应研究、厚试样和粗大析出物的观察分析及半导体微器件结构研究。
（五）扫描透射电子显微镜
扫描透射电子显微镜（ scAnning-trAnsmissioelectromicroscope，STEM）是既具有扫描电子显微镜又有透射电子显微镜功能的显微镜。STEM既与 SEM一样，能用电子束在样品表面扫描，又与 TEM一样，可通过电子穿透样品成像。但 STEM能获得 TEM所不能获得的一些关于样品的特殊信息。其优点是：
1利用 STEM可以观察厚试样和低衬度试样。2利用扫描透射模式对物镜的强激励可以实现微区衍射。3利用后接能量分析器可以分别收集和处理弹性散射和非弹性散射电子。但 STEM要求非常高的真空度，并且电子学系统比 TEM和 SEM都复杂。
（六）分析电子显微镜
分析电子显微镜（ AnAlyticAl electromicroscope，AEM）是由透射电子显微镜、扫描电子显微镜和电子探针组合而成的多功能新型电子显微镜。可在观察样本形貌的同时了解微小区域内所含元素的种类及其含量，在细胞超微结构水平上对其内部的化学元素成分进行定位、定性及定量分析。

普通光学显微镜的结构和功能

在医学教学、科研及临床工作中使用的普通光学显微镜有直立式和倾斜式（图 1-1）两类，均由机械部分、照明部分及光学部分组成。
一、机械部分
（一）镜座
镜座位于显微镜的昀下方，是显微镜的基座，起支持和稳定镜体的作用。
（二）镜柱
镜柱是与镜座和镜臂相连的垂直结构，其上装有调焦螺旋。
（三）调焦螺旋
调焦螺旋位于镜柱上，呈同心圆式排列，有大小两种螺旋。调焦螺旋的功能是调节焦距，大螺旋为粗调焦螺旋，可使镜台较快速地升降，适用于低倍镜调焦；小螺旋为细调焦螺旋，可使镜台缓慢升降，用作较精细的调节，适用于高倍镜和油镜调焦。
（四）镜臂
镜臂是手握提的结构，位于镜柱上方，略呈弓形。直立式显微镜在镜臂和镜柱之间有一倾斜关节，使用时可适当倾斜，但倾斜角度不能超过 45°，以免显微镜翻倒。
（五）镜筒
镜筒是位于镜臂上方的圆筒，上端装有目镜，下端连接物镜转换器。镜筒分单筒式和双筒式两种。
（六）物镜转换器物镜转换器又叫旋转盘，装在镜筒下方，呈圆盘状，下面有 3～ 4个物镜孔，可安装不同放大倍数的物镜。换用物镜时可转动旋转盘，注意一定要将旋转盘边缘的缺刻和基座上的“T”形卡相扣合，使物镜与光轴合轴，否则无法观察标本。
（七）镜台
镜台又叫载物台，是位于镜臂前方的方形或圆形平台，用于放置玻片标本。镜台中央有一通光孔，镜台上装有推片器，既可固定标本又可前后左右移动，推片器上有纵横游标尺，可利用游标尺上的刻度作为标记，以便寻找物像。老式显微镜的镜台上有一对压片夹，用以固定玻片标本。
二、照明部分
显微镜的照明装置由光源、反光镜、集光器和光圈等部分组成。
（一）光源
显微镜有带光源和不带光源两种。前者采用电光源照明，电光源灯一般装在镜座内或镜座后的灯壳中，可以使用镜座侧面的电压调节器调节光源强度；后者采用自然光源或人工外光源照明。
（二）反光镜
反光镜（ mirror）装在镜座上，可向各个方向转动，把光线反射入聚光镜。反光镜的一面是平面镜，另一面是凹面镜。平面镜只有反光作用，一般用于较强光线和固定光源。凹面镜既有反光作用也有聚光作用，适用于较弱光和散射光。有时在使用平面镜时，视野内会出现窗外景物或窗框等，可下降聚光镜或使用凹面镜以消除。
（三）集光器
集光器（ condenser）又名聚光器，位于通光孔下方，由一组透镜组成，可使反光镜反射来的光线集中于标本上。在镜柱的一侧有一集光器升降螺旋，可

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